銳賽生物集團

產品簡介：

• 本產品檢測原理基于碘化丙啶（Propidium,PI）染色方法分析細胞周期和凋亡。碘化丙啶是一種雙鏈DNA染料，其嵌入雙鏈DNA 中可以產生熒光，并且熒光的強度和雙鏈 DNA 的量成正比。

• 在細胞周期中，G0和G1 期細胞有一套染色體，G2 和 M 期細胞有兩套染色體，S 期介于兩者之間。經過碘化丙啶染色后，處在不同細胞周期中的細胞的熒光強度是不一樣的。假定G0 和 G1 期的細胞熒光強度為 1，那么G2 和 M 期的細胞的熒光強度為 2，S 期的細胞介于 1和 2之間。

• 細胞凋亡時，由于細胞核皺縮和DNA 片段化，染色時 DNA 片段會從打孔的細胞膜處丟失，流式細胞儀檢測時，熒光強度小于 1，即Sub-G1 峰或者凋亡細胞峰。

• 細胞凋亡也可以用流式細胞儀觀察細胞光散射的變化來檢測。凋亡前期，染色質皺縮，細胞密度增加，前向角光散色顯著降低。凋亡后期，細胞產生凋亡小體，前向角光散射和側向角光散色都顯著降低。

• 本試劑盒可用于培養的貼壁細胞或者懸浮細胞檢測，也可用于組織細胞檢測。

貯藏條件：

-20℃，避光條件下，保存1年以上。0-5℃，避光條件下，可以保存2個月。

使用說明：

1.自備試劑：PBS；70%乙醇

2.細胞樣品準備：

a、 貼壁細胞：吸棄細胞培養液，胰酶消化吹打細胞，制備單細胞懸液，1000g離心 5分鐘沉淀細胞后，用1ml 預冷的 PBS 重懸。然后再一次 1000g 離心 5分鐘沉淀細胞。

b、 懸浮細胞：1000g 離心 5分鐘沉淀細胞后，用1ml 預冷的 PBS 重懸。然后再一次 1000g 離心 5分鐘沉淀細胞。

c、 組織細胞：將組織塊用剪刀剪成盡量小的小塊后，用0.25%的胰酶消化 0.5-1 個小時。經過 200-400 目篩網過濾得到單細胞懸液。1000g離心 5分鐘沉淀細胞后，用1ml 預冷的 PBS 重懸。然后再一次 1000g 離心 5分鐘沉淀細胞。

3.細胞固定：細胞沉淀用 1ml 預冷的 70%乙醇輕輕混勻，4℃固定 2個小時以上或者過夜。接下來1000g 離心 5 分鐘沉淀細胞后，用 1ml 預冷的PBS 重懸。然后再次 1000g 離心 5 分鐘沉淀細胞。

4.染色：碘化丙啶染色液配置：0.5ml 染色緩沖液中加入10 ul碘化丙啶儲液和10ul RNase A，混勻待用。每個細胞樣品加入 0.5ml 配置好的碘化丙啶染色液，輕輕混勻重懸細胞。37℃，避光溫浴30 分鐘后，即可上流式細胞儀檢測（5 小時內完成為佳）。激發波長為 488nm，檢測紅色熒光。

注意事項：

1. 操作碘化丙啶時，應注意防護，保護眼睛、避免吸入、并戴一次性手套。

2. 碘化丙啶存在淬滅現象，保存和使用過程中注意避光。

包裝規格：